Der Archäologe Dr. Henry Jones wird von Regierungsagenten auf die Bundeslade angesetzt, das Behältnis, in dem Moses Gesetzestafeln aufbewahrt wurden. Laut Geheiminformationen suchen auch die Nazis nach der Lade, da sie den Besitzer unbesiegbar machen soll. Jones, genannt Indiana Jones, reist daraufhin nach Nepal, wo er einen alten Kollegen aufspüren will, jedoch nur dessen Tochter findet, die sich ihm anschließt. Ein altes Schmuckstück führt sie nach Ägypten, wo die Nazis mit Belloqs Hilfe bereits Ausgrabungen vornehmen. So kommt es zum Wettlauf um die Auffindung der Quelle der Seelen…